Середовище Ендо використовується для виділення та диференціації ентеробактерій за здатністю ферментувати лактозу. Механізм дії середовища базується на здатності фуксину утворювати безбарвний комплекс з сульфітом. Бактерії, які ростуть на середовищі, поділяють на дві групи. Ті бактерії, що не ферментують лактозу, ростуть у вигляді безбарвних колоній. Лактозоферментуючі бактерії утворюють альдегіди. В свою чергу, альдегіди зв'язують сульфіт та звільняють фуксин, що надає колоніям червоного кольору, іноді з металевим блиском.

Середовище перед використанням не стерилізуються. Посів проводять поверхневим методом, культивування ведеться при 37°С, результат оцінюють через 18-24 год.